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我们通过样品的颜色和质控做对比来确定雌狗的繁育期。如果样品的颜色和质控A的颜色一致，表明孕酮升到3ng/ml，该狗处于排卵的天，LH峰值很有可能在过去的24-72小时内已经出现。繁育应该在这次检测后的48~72小时内进行。
另外建议2~4天后再做一次样品检测，来确保孕酮含量在持续上升以及有排卵。
原理：
本试剂盒提供一种简单的半定量的孕酮检测方法，检测不需要其它的仪器。孕酮含量通过与质控A和质控B的颜色对比来确定。质控A相当于3ng/ml的孕酮含量，质控B相当于10ng/ml的孕酮含量。
为什么要使用孕酮检测？
1．因为尽管阴道涂片比较方便，但它不能给出一个准确的发情周期；
2．因为孕酮检测是被认可的可靠的方法用来指导交配时间；
3．使用该检测系统检控交配的成功率超过90%；
4．可以提高多产比例；
5．帮助判断分娩时间。
什么时候开始检测？
至少在发情前期即周期的前五天内做一个血清或血浆检测，来确定雌狗的孕酮水平基线。不同的狗的孕酮水平基线有所不同，但是经常在0-1.0ng/ml之间（样品检测结果的颜色比A质控和B质控深）。
如果你不喜欢做阴道涂片或者雌狗有繁殖问题，建议提早2-3天做孕酮检测，一直持续检测到确认孕酮含量升高（表明LH出现过峰值）。通常每隔一天做一次孕酮检测。
如果你使用阴道细胞学做繁育指导，一旦有50%-60%发生角化，每隔一天做一次孕酮检测。
繁殖期的时间选择
不成功的繁育大部分是因为繁育时间选择错误造成的。合适的繁育时间可以通过检测激素获得。出现发情的外在症状初被雌激素的变化所控制。但是，这些变化仅仅说明可能排卵，而且变化超过一周。精确的方法就是LH峰值检测，他实际上直接引发排卵。LH峰值后开始排卵。然后卵子需要2-3天成熟，并存活48-72小时。因此，繁殖期是LH峰值后的4-7天，的繁殖期是LH峰值后的5-6天。
Premate孕酮检测可以让你对LH峰值进行估计。在LH峰值时，孕酮含量达到1.5-2.5ng/ml。孕酮含量在整个发情周期内的2-3个月内会一直增长，怀孕的雌狗也一样。Premate能检测孕酮含量，一直到含量达到3ng/ml。
样品采集
血清：用试管采集血样1ml，允许它凝结（一般在室温条件下30分钟就会凝结），取表面液。
血浆：采集血样放入有肝素的试管中，以延长它的凝集时间。用离心充分分离出血浆和红血球。采集血浆检测。
准备试剂
将所有试剂放在室温中回温约30分钟。
拧开D号瓶子，将药片放入瓶子中（手不能触及），将喷嘴安装在瓶上，使劲摇晃使药片充分溶解。液体D的颜色应该是黄色的。
液体D在2~8摄氏度下可以保存三个月。
在0摄氏度可以保存到试剂的有效期。可以将液体D分装到小瓶（每个0.6ml），这样使用的时候只要拿出其中一瓶即可。
操作步骤
1、取出反应板，拿出必要的板孔 2+n（n代表样品数量）。做好标记。
2、加1滴A液到个孔，一滴B液到第二个孔，一滴样品到其他孔；
3、垂直加4滴C液到每个孔。盖上反应板，反应15-30分钟；
4、倒掉板内液体，充分洗板3次，然后将板用吸水纸拍干；
5、垂直加4滴D液到每个孔。盖上反应板，反应15分钟（必须确保15分钟）；
6、轻轻摇晃板，把板放在白纸上观察颜色。
结果
A孔是A质控，B孔是B质控，S孔是检测样品。
1 孕酮水平低于3ng/ml；
2 如果是对发情期监控，说明这只母狗未排卵，在2~3天后重复测试；
3 如果是在怀孕监控期间，那么这只母狗即将分娩，大概在24~48小时之内；
4 如果是在非发情期，说明这只狗在过去2月内没有排卵或没有发热，可以使用人工受精。
1 孕酮水平在3~10ng/ml之间；
2 如果是对发情期监控，说明即将排卵，1天后重复检测；
3 如果是怀孕监控期间，那么这只狗还未准备分娩，1天后再进行1次检测；
4 如果是在非发情期，说明这只狗发情并未被察觉或患了卵巢疾病。
1 孕酮水平高于10ng/ml；
2 如果是对发情期监控，说明这只母狗已经排卵可以立即交配或受精；
3 监控孕酮量足够以维持狗怀孕；
4 如果在怀孕期间的监控，原则上48小时内不可能分娩；也无查明在何时分娩。2天后再检测；
5 如果是在非发情期，说明这只狗发情并未被察觉或患了卵巢疾病。
1 孕酮水平达到10ng/ml；
2 如果是对发情期监控，说明这只母狗已经排卵，1到2天后可以交配或受精。